الجديد بريسكوب البدايات - منيرة القبيسي أنظر أيضا - هل الأندرال يعالج القلق والخوف؟ - خلايا الأنبوب الغربالي - زواج المتعة فضل زواج المتعة عند الإثنا عشرية - تهديد (قانون) جريمة التهديد في القانون الجزائري - هاتف وعنوان مستوصف المنير لطب الأسنان - الطائف المركزي, الطائف - قوس انعكاسي العَناصر - الفلاسفة الطبيعيون الفلسفة الطبيعية - ميكرومتر (جهاز قياس) مكونات جهاز الميكرومتر العادي - كرسول دقيق مرادف الاسم العلمي - كلمات - انت روحي - حمود السمه - دي ستايل المبادئ والتأثيرات - جامعة البطانة التأسيس - الدالة المحدودة - كرم بيرم - دواء كيورام مضاد حيوي واسع المجال Curam Drug - هندسة الغزل والنسيج - الرباط باعشن (دوعن) ال باعشن - مزواة مجالات الإستخدام - علاج تضييق فتحة الشرج بعد إجراء عملية البواسير - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمي جاهز عن الطحالب - - مزايا وعيوب الشركات ذات المسئولية المحدودة وهل تصلح للمشروعات الصغيرة - طريقة تحضير معجنات عمة ترباس من المطبخ السوداني بطريقة سهلة - ورشة بناء العوامل المساهمة في تنظيم الورشات - سمولفيل (الموسم الأول) الحلقات - قبيلة الوجيه نسب قبيلة الوجيه - أرقام طوارئ الكهرباء بالمملكة العربية السعودية - اللباس التقليدي المغربي أصوله - كوخ العم توم ملخص الرواية - [بحث جاهز للطباعة] نموذج مقدمة بحث بالانجليزي , نماذج بحوث انجليزي - - علاج مشاكل الشرخ الشرجي حتى بعد العملية - معركة دنديط انتشار الثورة - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمي جاهز عن الصلاة - - سونلغاز تاريخها - هند (اسم) في الشعر - السلام عليكم أنا عندي مشكلة في الثدي وهي الحلمتين الغائرتين للداخل و لم أتمكن من إرضاع - أين تقع جزيرة جيجو - طريقة عمل كيك جوز الهند البرتغالي من الشيف منال العالم - الصحة : لا إصابات جديدة بمرض الوادي المتصدع - سامحيني الممثلون - القرعاء (بريدة) الموقع - هاتف وعنوان مطعم سبأ - السلامه, جدة - مسار (منظومة) تعريف - شاحنه مان 18.410 موديل 2002 رقم عرض122224 مع انتريدر للمناطق الصعبه والوعره - قدمة ذات الورنية الوصف - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمي جاهز عن الفيزياء - - هاتف وعنوان صالون تام تام - الباحه - [بحث جاهز للطباعة] قائمة بعناوين مشاريع التخرج لتخصص التربية الاسلامية - - كفر حكيم تاريخ القرية - هيليكاز التركيب الكيميائي - جدول التفكيك إلى عوامل أولية من 1 إلى 100 - تولفون أقراص لعلاج اعراض القلق والاكتئاب Tolvon Tablets - هواتف مكتب الضمان الاجتماعى بنجران ومعلومات عنها بالسعودية - موعد في سامراء (قصة قصيرة) قصة مشابهة - قاموس البيانات قاموس البيانات - شاحنه مرسيدس شاسيه طويل بدون صحن جر طراز: 1840 موديل:2002 رقم العرض:1120025 - أفرين مزيل لإحتقان الجيوب الأنفية ولعلاج التهاب الأنف والرشح Afrin - نادي القتال (فيلم هندي) القصة - جدول مقاسات العدسات اللاصقة - جان هونوري فراغونارد - هاتف وعنوان النهاري للأختام - الطائف المركزي, الطائف - هواتف مؤسسة رعاية الفتيات بالاحساء ومعلومات عنها بالسعودية - صيغة خطاب طلب ترقية موظف حكومي - هاتف وعنوان شركة دانيا للأغذية - خميس مشيط, عسير - الأخلاط الأربعة الأربعة مزاجات - صبر سقطري فوائد الصبر - فينسنت كومباني معلومات عن اللاعب - أسماك الرعاد الوصف - حلقة كالفن المرحلة الأولى - تثبيت الكربون (Carbon Fixation) - مجموعة بولينا فروع الشركة - افضل انواع السمك بدون شوك - تفسير حلم رؤية حصان وخيل هائج للحامل والعزباء في المنام - دراسة جدوى مفصلة لمشروع إنتاج الكحول من المولاس - السهل الأوربي العظيم - منحني الإجهاد-الانفعال المواد المطيلية - تراجيديا تعريفها - هاتف وعنوان سنبل للأزياء النسائية - الشفا, مدينة الرياض - حكاية آرثر غوردن بيم من نانتاكيت - هدايا فروبل حركة فروبل - قرية عمارة ابيد - سوسن المستنقعات الموئل والانتشار - زينات بيطار ولادتها ودراستها - مساعد طبيب نظرة عامة - فوائد مغلي ورق التين للتنحيف - الكشوف الجغرافية الإسبانية دوافع الكشوف الجغرافية الإسبانية - العائلات الكيماوية القلائيات - صمام ضوئي طريقة العمل - هاتف وعنوان مستشفى الملك فهد - ابو عريش, جازان - كليوباترا المقدونية نشأتها وزواجها - الدولعي - ما تفسير وجود كيس كروي بجوار الخصية اليسرى؟ - هاتف وعنوان مستوصف ضبا الأهلي - ضبا, تبوك - كريم إفلوتزم Eflotism لعلاج نمو الشعر الزائد - اختفاء جعفر المصري (فيلم) قصة الفيلم - قائمة حكام الجزائر ملوك الجزائر - هاتف وعنوان مستوصف الأسرة الطبي - حي البديعة, مدينة الرياض - هاتف وعنوان مطعم الكوخ - الصحنه, محافظات الرياض - معلومات هامة عن سلالة دجاج المنتزه الذهبي - هواتف مستشفى الملك فهد و معلومات عنها فى بجــــــازان بالسعودية -
آخر المشاهدات بسط بن قيس - مشكلتي مع الخوف الاجتماعي... وفائدة السبرالكس - ديمبل كاباديا بداية الحياة - هاتف وعنوان مطابخ المنجف - العليا, مدينة الرياض - [بحث] ..لمن يريد تكفير ذنوبه.... - ملخصات وتقارير جاهزة للطباعة - فاصل ونعود (فيلم) القصة - وين احصل منظف لوجيك - معلومات و ارقام الاتصال معهد نيوهورايزن - طريقة تحضير حلى الرخام من كتاب النخبة بطريقة سهلة - غش البروتين الصيني التاريخ - وصفة هائلة من الطب البديل لعلاج الإسهال والقيء بالاعشاب - نقدم لكم ::شيول كتربيلر950 اي موديل 1990 رقم عرض1170901 - القوى التنافسية الخمسة لمايكل بورتر القوى الخمسة - تسامح أنواع التسامح و أهم المظاهر المرتبطة به - هوب فروغ - اهم الأدوات والمعدات اللازمة لفتح ورشة كهرباء - هاتف وعنوان مستشفى اليمامة - طريق خريص, مدينة الرياض - [بحث جاهز للطباعة] طرائق التدريس - - طريقة عمل الكبدة الاسكندرانى من مطبخ منال العالم - يا المنفي (أغنية) كلمات الأغنية - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمى عن الطلاق - - طريقة عمل شراب الزعفران البارد بطعم لذيذ لا تفوتكم - طريقة عمل شاي حليب كرك بطعم لا يقاوم - وصفة لعلاج الغدة الدرقية بالاعشاب الطبيعية من وصفات الدكتور عادل عبد العال - نموذج الشلال تاريخ النموذج - نكسيوم أقراص فيال لعلاج قرحة المعدة والحموضة Nexium Tablets - لهجة شمالية (سعودية) بعض كلمات ومفردات اللهجة - هاتف وعنوان شركة مساس الوطنية للخدمات الطبية - خميس مشيط, عسير - تقرير شامل عن عن الوان الطيف بحث جاهز للطباعة - كود هامنج مثال يبين كيفية استكشاف الخطأ - جويل أوستين السيرة - زويا صقر حياتها - معادلة ديفونتية أمثلة للمعادلات الديوفانتية - بطنج أسماؤه واستعمالاته - طريقة عمل شابورة جنان مثل المخابز لا تفوتك - سفشة أسماء علمية - صيغة خطاب طلب ترقية موظف حكومي - برنامج تسمين للنحيفات - قبيلة الأعشاش (المغرب) أصول قبيلة الأعشاش - قائمة الرموز المستخدمة في الفيزياء اللاتينية - إكتومثرين لعلاج الحكة الجلدية والجرب ولسعات الحشرات Ectomethrin - إتش تي تي بي 404 - قسم رقم 8 (فلم) قصة الفلم - قبيلة الصلبه نسب القبيلة وافخاد القبيلة - خوسيه أوغستو سانشيز بيريز آثاره - عايدة أبو نوار وفاتها - جيه كتلر مقاساته الجسمانية - غريز أناتومي الشخصيات - [بحث جاهز للطباعة] بحث حول علم الكيمياء , كل ما يخص الكيمياء - - [بحث جاهز للطباعة] بحث عن اللغة العربية والكفايات اللغويه - - طريقة تحضير خلية نحل الجالكسي بالصور بطريقة سهلة - إيمان ظاظا حياتها ومشوارها المهني - اعمال اخشاب الطوبار اعمال اخشاب الطوبار - تسمين المؤخرة بالحلبة : خلال 7 ايام - دالة ثابتة خصائص التابع الثابت - لهجة جنوبية لهجة منطقة عسير - عدد أنواع الأعداد - الشروط المطلوب استيفائها للحصول على ترخيص نقل البضائع والمهمات بأجر بالسعودية شروط ترخيص نقل البضائع - قسم طب الأطفال- كلية الطب- جامعة عين شمس قسم طب الأطفال - ما هي الاجراءات القانونيه لفتح محل تجاري او مصبغه - ذا منتاليست قصة المسلسل - وصفة هائلة من الطب البديل لعلاج الأكزيما بالاعشاب - وصفة هائلة من الطب البديل لعلاج القولون بالاعشاب - قائمة مدن البحرين جميع مدن وقرى البحرين - دالة محايدة تعريف - ملف ذهبي في طرائق التدريس (( التعليم التعاوني)) + موثق بالبربوينت والصور - الأرنوب المقدام قصة المسلسل - ما هو علاج بكتيريا اليوريا بلازما؟ - كسر (رياضيات) أنواع الكسور - أندريا دوريا السيرة - لازيلاكتون أقراص مدر للبول وخافض لضغط الدم Lasilactone Tablets - شيتو كبسولات مكمل غذائى لتخفيض الوزن Chito Capsules - الخليوي نبذة عن عائلة الخليوي - الغطريف بن عطاء - سيسيليا باين الحياة المبكرة - تعالجت من جرثومة المعدة، وشفيت، ويبدو أنها عادت! أفيدوني. - ألفرد فيرنر - أرقام طوارئ الكهرباء بالمملكة العربية السعودية - هاتف وعنوان السقا للديكور والأثاث - الحره الشرقيه, المدينة المنورة - قوى فان دير فالس روابط (قوى) فان درفال - طريقة عمل وصفة مخلل اللارنج بالملح الشهية - سيسيليا غابرييلا - هاتف وعنوان برجر كنج ميدل ايست ( الادارة العامة ) - الملز, مدينة الرياض - علاء الدين (حكاية) ملخص الحكاية - مشروع تخرج لطلبة كلية التربية قسم اللغة الإنجليزية جاهز للطباعة - علال القلدة (فيلم) - هاتف وعنوان مؤسسة إبراهيم محمد النجراني التجارية - العليا, مدينة الرياض - هاتف وعنوان شركة سلكي لاسلكي الوطنية للإتصالات المحدودة - العليا, مدينة الرياض - السلام عليكم انا ولدت ولادة قيصيرية وتوقف الدم بعد الولادة بثلاثة ايام ثم عاد في - نايف جابر الأحمد الصباح أسرته - الاستكمال الرياضي بفروق نيوتن طرق الاستكمال - متلازمة كليبل فيل الأعراض والعلامات - بنتيل اقرأ أيضاً - قائمة مدربي نادي برشلونة قائمة المدربين - وصفة هائلة من الطب البديل لعلاج الصدفية بالاعشاب - [ رقم هاتف ] شركة حمد العيسى وأولاده للأجهزة المنزلية - خميس مشيط, عسير - أبطال الكرة الشخصيات - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمي جاهز عن الفيزياء - - عبد الله بن فودي اسمه ونسبه - الاستعلام عن صلاحية دفتر المركبة بالكويت - متلازمة اردهايم تشيستر الأعراض - هل احتقان البروستاتا يسبب ألما في الخصية والعانة؟ - القرعاء (بريدة) الموقع - جنس شرجي الجنس الشرجي والغيرية الجنسية - درجات إستواء اللحم اللون - أحمد (شاي) قصة شاي أحمد http //www.ahmadtea.com/our-story/ - طريقة عمل وصفة بودينغ بالكريما والسميد الشهية - لودر كات 950 بي موديل 1983 جاهز للعمل فوراً - عنيز ابوسالم الترباني نشأته - هاتف وعنوان الشئون الصحية بالحرس الوطني , مركز الأعمال - الحرس الوطني, مدينة الرياض - اللباس التقليدي المغربي أصوله - غيدا فخري النشأة والمسيرة - أين تقع جزيرة جيجو - خلايا الأنبوب الغربالي - على مر الزمان (مسلسل) قصة المسلسل - طريقة عمل وصفة الكراوية من منال العالم - وصفة لعلاج سلس البراز بالاعشاب الطبيعية - معركة الحلوة - هاتف وعنوان ثلاجة الزهراني للأسماك - العليا, مدينة الرياض - أيتوس - متشابه (القرآن) تعريف المحكم والمتشابه - كرسول دقيق مرادف الاسم العلمي - عثمان خالد أبو جحجوح الروائي والأديب الفلسطيني / عثمان خالد أبو جحجوح (1951- ) - يابوس - اختصارات مستخدمة في الوصفات الطبية - نقش أم الجمال الأول - بريسكوب البدايات - منيرة القبيسي أنظر أيضا - هل الأندرال يعالج القلق والخوف؟ - زواج المتعة فضل زواج المتعة عند الإثنا عشرية - تهديد (قانون) جريمة التهديد في القانون الجزائري - هاتف وعنوان مستوصف المنير لطب الأسنان - الطائف المركزي, الطائف - قوس انعكاسي العَناصر - الفلاسفة الطبيعيون الفلسفة الطبيعية - ميكرومتر (جهاز قياس) مكونات جهاز الميكرومتر العادي - كلمات - انت روحي - حمود السمه - دي ستايل المبادئ والتأثيرات - جامعة البطانة التأسيس - الدالة المحدودة - دواء كيورام مضاد حيوي واسع المجال Curam Drug - كرم بيرم - هندسة الغزل والنسيج - الرباط باعشن (دوعن) ال باعشن - مزواة مجالات الإستخدام - علاج تضييق فتحة الشرج بعد إجراء عملية البواسير - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمي جاهز عن الطحالب - - مزايا وعيوب الشركات ذات المسئولية المحدودة وهل تصلح للمشروعات الصغيرة - طريقة تحضير معجنات عمة ترباس من المطبخ السوداني بطريقة سهلة - ورشة بناء العوامل المساهمة في تنظيم الورشات - سمولفيل (الموسم الأول) الحلقات - قبيلة الوجيه نسب قبيلة الوجيه - كوخ العم توم ملخص الرواية - [بحث جاهز للطباعة] نموذج مقدمة بحث بالانجليزي , نماذج بحوث انجليزي - - علاج مشاكل الشرخ الشرجي حتى بعد العملية - معركة دنديط انتشار الثورة - [بحث جاهز للطباعة] بحث علمي جاهز عن الصلاة - - سونلغاز تاريخها - هند (اسم) في الشعر - السلام عليكم أنا عندي مشكلة في الثدي وهي الحلمتين الغائرتين للداخل و لم أتمكن من إرضاع - طريقة عمل كيك جوز الهند البرتغالي من الشيف منال العالم - الصحة : لا إصابات جديدة بمرض الوادي المتصدع - سامحيني الممثلون - هاتف وعنوان مطعم سبأ - السلامه, جدة - شاحنه مان 18.410 موديل 2002 رقم عرض122224 مع انتريدر للمناطق الصعبه والوعره - مسار (منظومة) تعريف - قدمة ذات الورنية الوصف - هاتف وعنوان صالون تام تام - الباحه - [بحث جاهز للطباعة] قائمة بعناوين مشاريع التخرج لتخصص التربية الاسلامية - - كفر حكيم تاريخ القرية - هيليكاز التركيب الكيميائي - جدول التفكيك إلى عوامل أولية من 1 إلى 100 - تولفون أقراص لعلاج اعراض القلق والاكتئاب Tolvon Tablets - هواتف مكتب الضمان الاجتماعى بنجران ومعلومات عنها بالسعودية - موعد في سامراء (قصة قصيرة) قصة مشابهة - قاموس البيانات قاموس البيانات - شاحنه مرسيدس شاسيه طويل بدون صحن جر طراز: 1840 موديل:2002 رقم العرض:1120025 - أفرين مزيل لإحتقان الجيوب الأنفية ولعلاج التهاب الأنف والرشح Afrin - نادي القتال (فيلم هندي) القصة - جدول مقاسات العدسات اللاصقة - جان هونوري فراغونارد - هاتف وعنوان النهاري للأختام - الطائف المركزي, الطائف - هواتف مؤسسة رعاية الفتيات بالاحساء ومعلومات عنها بالسعودية - هاتف وعنوان شركة دانيا للأغذية - خميس مشيط, عسير - صبر سقطري فوائد الصبر - الأخلاط الأربعة الأربعة مزاجات - فينسنت كومباني معلومات عن اللاعب - أسماك الرعاد الوصف - حلقة كالفن المرحلة الأولى - تثبيت الكربون (Carbon Fixation) - مجموعة بولينا فروع الشركة - افضل انواع السمك بدون شوك - تفسير حلم رؤية حصان وخيل هائج للحامل والعزباء في المنام - دراسة جدوى مفصلة لمشروع إنتاج الكحول من المولاس - السهل الأوربي العظيم - منحني الإجهاد-الانفعال المواد المطيلية - تراجيديا تعريفها - هاتف وعنوان سنبل للأزياء النسائية - الشفا, مدينة الرياض - حكاية آرثر غوردن بيم من نانتاكيت - هدايا فروبل حركة فروبل - قرية عمارة ابيد - سوسن المستنقعات الموئل والانتشار -
اليوم: السبت 28 نوفمبر 2020 , الساعة: 8:12 م


اعلانات

محرك البحث


تثبيت (علم الأنسجة) أغراض التثبيت

آخر تحديث منذ 1 ساعة و 11 دقيقة 481 مشاهدة

اعلانات
عزيزي زائر الموقع تم إعداد وإختيار هذا الموضوع تثبيت (علم الأنسجة) أغراض التثبيت فإن كان لديك ملاحظة او توجيه يمكنك مراسلتنا من خلال الخيارات الموجودة بالموضوع.. وكذلك يمكنك زيارة القسم وتصفح المواضيع المتنوعه... آخر تحديث للمعلومات بتاريخ اليوم 28/11/2020

أغراض التثبيت


يتم إجراء تثبيت الأنسجة لأسباب عديدة. من بين هذه الأسباب قتل النسيج بحيث يتم منع تحلل ما بعد الوفاة (التحلل الذاتي والتعفن). مرجع كتاب العنوان Histotechnology A Self-Instructional Text الأخير Carson الأول Freida L وصلة المؤلف المؤلفين المشاركين Christa Hladik الإصدار 3 سنة الناشر American Society for Clinical Pathology Press مكان Hong Kong الرقم المعياري 978-0-89189-581-7 الصفحة 2 الصفحات مسار تاريخ الوصول
تحتفظ عملية التثبيت بعينة من المواد البيولوجية (النسيج أو الخلايا) قريبًا من حالتها الطبيعية قدر الإمكان في عملية إعداد الأنسجة لفحصها. ولتحقيق هذا، يجب تحقيق عادة عدة شروط.


أولاً يعمل المثبت عادة على تعطيل الجزيئات حيوية المنشأ - لا سيما إنزيمات التحلل البروتيني —التي تهضم أو تتلف العينة.


ثانيًا يعمل المثبت عادة على حماية العينة من التلف الخارجي. تُعتبر المثبتات سامة للكائنات الدقيقة الأكثر شيوعًا ( بكتيريا البكتيريا بشكل خاص) التي قد توجد في عينة الأنسجة أو التي قد تستعمر الأنسجة المثبتة. علاوة على ذلك، تقوم العديد من المثبتات كيميائيًا بتغيير المواد المثبتة أقل مذاقًا (إما غير قابلة للهضم أو سامة) بالنسبة للكائنات الدقيقة الانتهازية.


وأخيرًا غالبًا ما تقوم المثبتات بتغيير الخلايا أو الأنسجة على المستوى الجزيئي لزيادة قوتها الميكانيكية أو استقرارها. وهذه القوة والصلابة المتزايدة يمكن أن تساعد في المحافظة على مورفولوجيا (شكل وبنية) العينة عند معالجتها لإجراء مزيد من التحليل.


وحتى التثبيت الأكثر حذرًا يغير العينة ويقدم أجزاء اصطناعية يمكنها أن تتداخل مع تفسير البنية المستدقة الخلوية. أحد الأمثلة البارزة هو < >الجسيم المتوسط البكتيري، الذي كان يُعتقد أن يكون عضي في البكتيريا موجبة الجرام في سبعينيات القرن الماضي، ولكنه تبين لاحقًا بواسطة التقنيات الجديدة التي تم تطويرها للمجهر الإلكتروني أنه مجرد جزء اصطناعي من التثبيت الكيميائي. cite journal author Ryter A Contribution of new cryomethods to a better knowledge of bacterial anatomy journal Ann. Inst. Pasteur Microbiol. volume 139 issue 1 pages 33–44 year 1988 pmid 3289587 doi 10.1016/0769-2609(88)90095-6 cite journal author Friedrich, CL coauthors D Moyles, TJ Beveridge, REW Hancock Antibacterial Action of Structurally Diverse Cationic Peptides on Gram-Positive Bacteria journal Antiomicrobial Agents and Ch otherapy volume 44 issue 8 pages 2086–2092 year 2000 doi 10.1128/AAC.44.8.2086-2092.2000 pmid 10898680 وتوحيد التثبيت وغيره من إجراءات معالجة الأنسجة الأخرى يأخذ تقديم هذه الأجزاء الاصطناعية بعين الاعتبار من خلال تحديد الإجراءات التي تقدم هذه الأجزاء الاصطناعية وما هي أنواع هذه الأجزاء الاصطناعية. والباحثون الذين يعرفون أنواع الأجزاء الاصطناعية المتوقعة مع كل نوع من الأنسجة وأسلوب المعالجة يستطيعون تفسير الأقسام مع الأجزاء الاصطناعية بدقة أو اختيار تقنيات تقلل الأجواء الاصطناعية في المناطق محل الاهتمام.



عملية التثبيت


عادة ما يكون التثبيت هو المرحلة الأولى في عملية متعددة المراحل لتحضير عينة من مادة بيولوجية للفحص المجهري أو غير ذلك من التحاليل. وبالتالي قد يتوقف اختيار المثبت وبروتوكول التثبيت على خطوات معالجة إضافية وتحليلات نهائية تم التخطيط لها. على سبيل المثال تستخدم الكيمياء الهيستولوجية المناعية أجسامًا مضادة تلتصق بهدف بروتيني محدد. ويمكن كيميائيًا للتثبيت المطول إخفاء هذه الأهداف ومنع التصاق الأجسام المضادة. وفي هذه الحالات، عادة ما يتم استخدام طريقة (تثبيت سريع) باستخدام الفورمالين لمدة 24 ساعة تقريبًا.


والمواد المستخدمة


أنواع التثبيت


هناك ثلاثة أنواع من عملية التثبيت بشكل عام


التثبيت بالحرارة بعد تجفيف اللطاخة في درجة حرارة الغرفة، يتم مسك الشريحة بملقط أو مشبك وتمريرها عبر شعلة الموقد عدة مرات للقتل بالحرارة ولصق الكائن الحي بالشريحة. ويُستخدم هذا النوع بشكل روتيني مع البكتيريا والعتائق. وعملية التثبيت بالحرارة عادة ما تحتفظ بالمورفولوجيا العامة ولكنها لا تحتفظ بمورفولوجيا الهياكل الداخلية.


وتعمل الحرارة على تغيير الخصائص الطبيعية الإنزيم الحال للبروتين ومنع التحلل الذاتي. ويتعذر استخدام التثبيت بالحرارة في طريقة اللطخة المحفظية نظرًا لأن التثبيت بالحرارة سوف يسبب انكماش الكبسولة أو تدميرها (الكنان السكري) ويتعذر رؤيته في اللطخات.


التثبيت بالإرواء عبر تدفق الدم. يتم حقن المثبت في القلب بمقدار حقن يتوافق مع النتاج القلبي. وينتشر المثبت عبر الجسم كله، ولا يموت النسيج حتى يتم تثبيته. وهذه العملية تتميز بميزة المحافظة على المورفولوجيا الكاملة، ولكن يعيبها أن الخاضع للعملية يموت والتكلفة عالية (بسبب مقدار المثبت اللازم للكائنات الدقيق الأكبر حجمًا)



الغمر يتم غمر عينة الأنسجة في مثبت بمقدار أكبر 20 مرة على الأقل من حجم النسيج المراد تثبيته. ويجب انتشار المثبت عبر النسيج المراد تثبيته، لذلك يجب الأخذ بعين الاعتبار حجم النسيج وكثافته وكذلك نوع المثبت. واستخدام عينة أكبر حجمًا يعني أن الأمر يستغرق وقتًا أطول حتى يصل المثبت إلى النسيج الأكثر عمقًا. هذه الطريقة هي الأفضل في حالة الفراغ الخفيف.



التثبيت الكيميائي

في هذه العملية، يتم الاحتفاظ بالهياكل في حالة (كيميائيًا وبنيويًا) قربية من الأنسجة الحية قدر الإمكان. وهذا يتطلب مثبتًا كيميائيًا يمكنه تحقيق الاستقرار للبروتينات والأحماض النووية والمواد المخاطية للأنسجة من خلال جعلها غير قابلة للذوبان.



أنواع المثبتات الكيميائية


المثبتات التشابكية - ألدهيدات


تعمل المثبتات التشابكية من خلال خلق رابطة تساهمية الروابط الكيميائية التساهمية بين البروتينات في النسيج. وهذا يثبت البروتينات القابلة للذوبان بالهيكل الخلوي، ويضفي صلابة إضافية على الأنسجة.


وإلى حد بعيد فإن المثبت الأكثر شيوعًا في الاستخدام في الأنسجة هو الفورمالديهايد. وعادة ما يُستخدم كفورمالين محمي محايد 10 أي حوالي الفورمالديهايد ما بين 3.7 و4 في دارئ الفوسفات الملحي. ونظرًا لأن الفورمالديهايد هو غاز في درجة حرارة الغرفة، يتحلل غاز فورمالين-الفورمالديهايد في الماء (~37 w/v) - يُستخدم عند إجراء مثبت سابق. بارافورمالدهيد هو شكل مبلمر من الفورمالديهايد،، يتم الحصول عليه عادة على شكل مسحوق أبيض دقيق، الذي يزيل البلمرة ويعود إلى الفورمالين عند تسخينه. يقوم الفورمالديهايد بتثبيت الأنسجة بواسطة تشبيك البروتينات، وفي المقام الأول بقايا الحمض الأميني الأساسي ليزين. وآثاره قابلة للرد عن طريق الماء الزائد وهو يتجنب تصبغ الفورمالين. ومن بين الفوائد الأخرى التخزين طويل المدى والاختراق الجيد للأنسجة. وهو جيد على نحو خاص لتقنيات الكيمياء الهيستولوجية المناعية. ويمكن أيضًا أن يُستخدم بخار الفورمالديهايد كمثبتات للطخات الخلية.


وهناك ألدهيد شائع آخر لعملية التثبيت وهو غلوتارالدهيد. وهو يعمل بطريقة مماثلة للفورمالديهايد من خلال التسبب في تشوه هياكل ألفا-الحلزوني في البروتينات. ومع ذلك غلوتارالدهيد هو جزيء أكبر حجمًا، ولذلك فإن معدل انتشاره عبر الأغشية أبطأ من الفورمالديهايد. وبالتالي قد تتم إعاقة تثبيت غلوتارالدهيد على عينات الأنسجة الأكثر سمكًا، ولكن يمكن التغلب على هذه المشكلة عن طريق تقليل حجم عينة الأنسجة. وإحدى مزايا التثبيت بالغلوتارالدهيد هو أنه قد يتيح منتجًا أكثر صلابة أو أكثر ارتباطًا وطوله الأكبر ومجموعتي الألدهيد يتيحان له ’إيصال‘ وربط أزواج جزيئات البروتين الأبعد. وإنه يسبب تغيرات سريعة غير قابلة للإعادة ويقوم بعملية التثبيت على نحو سريع ومناسب تمامًا للمجهر الإلكتروني، ويقوم بعملية التثبيت عند 4oC، ويعطي أفضل التفاصيل الهيولية والنووية العامة. ومع ذلك فإنه ليس مثاليًا لتلطيخ الكيمياء الهيستولوجية المناعية.

وبعض بروتوكولات التثبيت تدعو إلى الجمع بين الفورمالديهايد والغلوتارالدهيد بحيث تكمل قوة كل منهما الآخر.


وهذه المثبتات المتشابكة لا سيما الفورمالديهايد تميل للمحافظة على البنية الثانوية للبروتينات وربما تحمي كميات كبيرة من البنية الثالثة أيضًا.


المثبتات المرسبة - الكحولات


تعمل المثبتات المرسبة (أو < >المغيرة للطبيعة) من خلال تقليل قابلية ذوبان جزيئات البروتينات و(غالبًا) من خلال تعطيل التفاعلات الكارهة للماء التي تعطي الكثير من البروتينات بنيتها الثالثة. وعملية ترسيب وتجميع البروتينات هي عملية مختلفة بشكل كبير عن التشابك الذي يحدث مع مثبتات ألدهيد.



والمثبتات الترسبية الأكثر شيوعًا هي إيثانول الإيثانول و ميثانول الميثانول . وتُستخدم عادة لتثبيت الأجزاء المجمدة واللطخات. ويُستخدم أسيتون الأسيتون أيضًا وقد تبين أنه يعطي حماية هيستولوجية (الأنسجة) أفضل من الأجزاء المجمدة عند استخدامه في تقنية أسيتون ميثيل البنزوات الزيلين.(AMEX).


ونادرًا ما تُستخدم ممسخات البروتينات - الميثانول والإيثانول والأسيتون - وحدها كحواجز تثبيت ما لم تدرس الأحماض الأمينية.


حمض الخليك هو ممسخ يُستخدم أحيانًا جنبًا إلى جنب مع المثبتات الترسبية الأخرى. ومن المعروف أن الكحوليات -في حد ذاتها- تسبب انكماش وتصلب الأنسجة أثناء التثبيت في حين أن حمض الخليك وحده معروف بتسببه في انتفاخ الأنسجة؛ والجمع بين المركبين قد يؤدي إلى محافظة أفضل على مورفولوجيا الأنسجة.


العوامل المؤكسدة


يمكن للمثبتات المؤكسدة التفاعل مع سلاسل جانبية مختلفة للبروتينات والجزيئات الحيوية الأخرى، مما يتيح تشكيل تشابكات تعمل على استقرار بنية الأنسجة. ومع ذلك، تسبب هذه المثبتات تمسخًا واسع النطاق على الرغم من المحافظة على نقاء بنية الخلية وتُستخدم بشكل رئيس كمثبتات ثانوية.


أكسيد الأوزميوم الثماني رباعي أكسيد الأوزميوم يُستخدم في كثير من الأحيان كمثبت ثانوي عند تحضير العينات للمجهر الإلكتروني. (لا يتم استخدامه للفحص المجهري الضوئي حيث إنه يخترق الأجزاء السميكة للأنسجة بشكل ضعيف للغاية.)


يمكن استخدام ثاني كرومات البوتاسيوم وحامض الكروم و بيرمنغنات البوتاسيوم برمنغنات البوتاسيوم في تحضيرات هيستولوجية معينة.


الزئبقيات


تتمتع الزئبقيات مثل B-5 ومثبت زنكر بآلية غير معروفة تزيد سطوع اللطخة وتعطي تفاصيل نووية ممتازة. وعلى الرغم من سرعتها، فإن الزئبقيات تخترق بشكل ضعيف وتسبب انكماش الأنسجة. وأفضل تطبيق لها هو تثبيت الأنسجة المكونة للدم والأنسجة الشبكية البطانية. لاحظ أيضًا أنه نظرًا لأنها تحتوي على زئبق يجب توخي الحذر عند التخلص منها.


البيكرات


تخترق البكرات الأنسجة بشكل جيد للتفاعل مع الهيستونات والبروتينات الأساسية لتكوين البكرات البلورية مع الأحماض الأمينية وترسيب جميع البروتينات. وهي تُعتبر مثبتًا جيدًا للأنسجة الضامة وتحفظ الجليكوجين بشكل جيد وتستخرج الدهون لإعطاء نتائج فائقة للفورمالديهايد في التلطيخ المناعي للهرمونات بيولوجية المنشأ وعديدة الببتيد. ومع ذلك، فإنها تسبب فقدان كثرة القعدات ما لم يتم غسل العينة جيدًا عقب التثبيت.


مثبت HOPE


يعطي تأثير حماية حمض هيبس-غلوتاميك المذيب العضوي الدارئ (HOPE) مورفولوجيا شبيهة بالفورمالين ومحافظة ممتازة على المستضدات البروتينية المناعية للكيمياء الهيستولوجية المناعية والكيمياء النسيجية للإنزيمات ونتائج جيدة للحمض النووي (RNA) والحمض الريبي النووي المنزوع الأكسجين (DNA) وعدم وجود البروتينات المتشابكة.


الأقسام المجمدة


توضع قطع صغيرة من الأنسجة (5×5×3مم) على وسيط واقٍ من البرد - OCT أو TBS أو كرايجول - ثم تُجمد في نظير البنتان يتم تبريده بواسطة النتروجين السائل. يتم بعد ذلك تقسيم الأنسجة في مشراح دقيق للتجميد أو ناظم البرد. يتم بعد ذلك تثبيت الأقسام في أحد المثبتات التالية

الأسيتون الخالص لمدة تتراوح من 10 إلى 15 دقيقة،

95 إيثانول لمدة تتراوح من 10 إلى 15 دقيقة أو

الأسيتون الخالص لمدة 10 دقائق يتبعه 95 إيثانول لمدة 10 دقائق


المزايا




  • إعطاء محافظة أفضل للاستضداد

  • حد أدنى من التعرض للمثبت

  • عدم التعرض للمذيبات العضوية

  • أسرع بكثير من الأشكال الأخرى من التثبيتات.



العيوب




  • نقص التفاصيل المورفولوجية

  • إحداث خطر بيولوجي محتمل



الأوامر والنواهي للمثبتات الكيميائية




-

! الهدف

! المثبت المختار

! المثبت المطلوب تجنبه

-

البروتينات

الفورمالين والبارافورمالدهايد المعزول المحايد

رباعي أكسيد الأوزميوم

-

الإنزيمات

الأقسام المجمدة

المثبتات الكيميائية

-

الدهون

الأقسام المجمدة*، غلوتارالدهيد/رابع أكسيد الأوزميوم

المثبتات الكحولية، الفورمالين الدارئ المحايد

-

الأحماض النووية

المثبتات الكحولية، HOPE

مثبتات ألدهيد

-

عديدات السكاريد المخاطية

الأقسام المجمدة

المثبتات الكيميائية

-

الأمينات بيولوجية المنشأ

محلول بوين~، الفورمالين الدارئ المحايد



-

الجليكوجين

المثبتات القائمة على الكحوليات

رباعي أكسيد الأوزميوم




  • تقوم الأقسام المجمدة بالمحافظة على الحمض النووي الريبي (RNA) والدهون على الرغم من ضعف المورفولوجيا. قارن مع أقسام البارافين، المرادفة للمثبتات الكيميائية في الجدول، التي تدمر الحمض النووي الريبي (RNA) وتؤثر على بعض المستضدات ولكنها تعطي مورفولوجيا جيدة.

  • ~ بكرات


    العوامل المؤثرة على التثبيت


    الأس الهيدروجيني (pH)


    يجب أن يظل في النطاق الفسيولوجي، بين 4 و9pH. يجب الاحتفاظ بالأس الهيدروجيني الخاص بحماية البنية المستدقة بين 7.2 و7.4.


    الأسموزية


    تؤدي المحاليل مفرطة التوتر إلى انكماش الخلية.


    وتؤدي المحاليل ناقصة التوتر إلى تورم الخلية وضعف التثبيت.


    الفورمالين الدارئ المحايد هو 4 فورمالدهايد (1.33 أسمولي) في دارئ كبريتيد الرصاص الثنائي (0.3 أسمولي) ويصل إلى 1.63 أسمولي. وهذا محلول مفرط التوتر جدًا إلا أنه عمل بشكل جيد كعامل عام لتثبيت الأنسجة لسنوات عديدة في مختبرات علم الأمراض.


    حجم العينة


    1-4مم سماكة


    حجم المثبت


    أكبر 15 إلى 20 مرة على الأقل من حجم النسيج


    درجة الحرارة


    إن زيادة درجة الحرارة يزيد من سرعة التثبيت. ومع ذلك، الأمر يتطلب عناية لتجنب طهي العينة. عادة ما يتم التثبيت في درجة حرارة الغرفة.


    المدة


    كقاعدة عامة ساعة واحدة لكل 1 مم


    الوقت بعد الإزالة للتثبيت


    التثبيت هو عملية كيميائية، ويجب ترك الوقت الكافي بما يسمح باستكمال العملية. وعلى الرغم من أن التثبيت الزائد يمكن أن يكون ضارًا، إلا أنه تم مؤخرًا تقييم التثبيت غير المكتمل على أنه يمثل مشكلة كبيرة وقد يكون مسؤولاً عن نتائج غير ملائمة لبعض المقايسات.


    في مجالات علم الأنسجة و علم الأمراض و علم الأحياء الخلوي ، التثبيت (بالإنجليزية fixation) هو عملية كيميائية يتم من خلالها المحافظة على الأنسجة البيولوجية من التحلل، وبالتالي منع التحلل الذاتي أو تفسخ التعفن . وتقوم عملية التثبيت بإنهاء أي تفاعلات كيميائية حيوية جارية، وقد تزيد أيضًا من القوة ال ميكانيكا ميكانيكية أو استقرار الأنسجة المعالجة.

    شاركنا رأيك

     
    اعلانات
    التعليقات (1 تعليق)

    (اضيف قبل 6 شهر و 20 يوم)

    انسخ الارقام تحتهم


    زائر    
    طلب حذف التعليق

    ------------------------
    موضوع شييق
     


    أقسام الموقع المتنوعة أوجدت لخدمة الزائر ليسهل عليه تصفح الموقع بسلاسة وأخذ المعلومات تصفح هذا الموضوع تثبيت (علم الأنسجة) أغراض التثبيت ويمكنك مراسلتنا في حال الملاحظات او التعديل او الإضافة او طلب حذف الموضوع ...آخر تعديل اليوم 28/11/2020



    الاكثر مشاهدة في شبكة طريق 95
    اخبار لم تشاهدها من قبل
    موضوعات خاصة بالقارئ
    الأكثر مشاهدة خلال 24 ساعة
    الأكثر قراءة
    الموضوعات الاكثر بحث علي مدار الساعة
    الموضوعات الاكثر مناقشة
    الاكثر مناقشه بالقرب مني